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監(jiān)測是防控動物疫病的基礎(chǔ),是制定防控建設(shè)的一級依據(jù)。當(dāng)前非洲豬瘟疫情嚴(yán)峻,通過進(jìn)行豬場環(huán)境的監(jiān)測,可以及時(shí)發(fā)現(xiàn)非洲豬瘟疫情隱患,有效切斷病原傳播途徑,為非洲豬瘟防控決策提供科學(xué)依據(jù)。
非洲豬瘟病毒,具有龐大而復(fù)雜的基因組,擁有超強(qiáng)的體外生存能力,雖然宿主單一,只感染豬和野豬,但傳播源和傳播途徑都十分復(fù)雜。因?yàn)榉侵挢i瘟病毒的這些特點(diǎn),導(dǎo)致非洲豬瘟的防控工作實(shí)施難度大。
能否在感染之前,及時(shí)地把非洲豬瘟病毒“揪”出來,是能否有效避免非洲豬瘟病毒侵害的關(guān)鍵之一。在復(fù)產(chǎn)方面,豬場能否成功,清場后是否做到全面凈化非洲豬瘟病毒,必須通過全面的環(huán)境監(jiān)測來驗(yàn)證。
2019年4月,農(nóng)業(yè)農(nóng)村部發(fā)布《關(guān)于加強(qiáng)養(yǎng)殖環(huán)節(jié)非洲豬瘟疫情排查的通知》,鼓勵(lì)規(guī)模豬場和種豬場開展非洲豬瘟自檢,熒光定量PCR檢測是可以替代病毒分離鑒定的一種靈敏、特異、快速的ASFV檢測技術(shù),被認(rèn)為是ASFV核酸檢測的金標(biāo)準(zhǔn),被用在OIE所有的區(qū)域性參考實(shí)驗(yàn)室。不少規(guī)模豬場開始自我配備相應(yīng)設(shè)備開始自檢,但很多人對如何有效采集檢測樣本比較疑惑,今天小編為大家簡單介紹一下:
一、血液采樣
使用含有抗凝血?jiǎng)?EDTA)的無菌管(真空采血管)從頸靜脈、下腔靜脈或耳靜脈抽取全血。如果動物已經(jīng)死亡,可以從心臟中采血,但必須立即進(jìn)行。避免使用肝素(綠色蓋子),因?yàn)槠淇梢砸种芇CR反應(yīng)(造成假陰性),和/或由于紅細(xì)胞吸附試驗(yàn)(HAD)造成假陽性的產(chǎn)生。但采集血液要求豬場技術(shù)人員能熟練操作,否則易造成豬流血污染,導(dǎo)致病毒擴(kuò)散,所以不建議豬場頻繁采血檢測;
二、唾液采樣
在正常生產(chǎn)情況下,病毒可能在1~2個(gè)月前就出現(xiàn)在唾液中了。因此,與血液檢測相比,通過唾液檢測,能夠較早地發(fā)現(xiàn)豬只是否感染了病毒。不僅如此,豬只感染ASFV后,首先出現(xiàn)在口腔中,時(shí)間可能長達(dá)2~3個(gè)月?!翱谇粌?nèi)局部感染階段是非洲豬瘟窗口期檢測的重要時(shí)機(jī),此時(shí)尚未形成病毒血癥,積極采取措施能有效防控病毒爆發(fā)及擴(kuò)散。唾液采集要求:
1、采集的唾液樣本要求清亮、透明并不得含有食物殘?jiān)?,故采樣之前的停食至關(guān)重要,原則上要求停食 12 小時(shí)以上;
2、唾液中含有豐富的具備活性的酶。機(jī)體健康狀態(tài)不同,酶的含量也千差萬別,從而導(dǎo)致唾液中的病原體半衰期長短不一,對于非洲豬瘟病毒來說,長者 2~3 天,短者 1~2 小時(shí)不等。病原半衰期的存在是導(dǎo)致唾液學(xué)非洲豬瘟病毒漏檢率稍高的重要因素之一。因此采集完唾液要及時(shí)冰凍保存,并在三小時(shí)內(nèi)完成檢測。
三、環(huán)境、人員采樣
對于未發(fā)病豬場,及時(shí)了解生產(chǎn)生活區(qū)、周邊環(huán)境、裝豬臺、盤豬場等地區(qū)消毒是否徹底,有沒受到非洲豬瘟威脅?豬場更換養(yǎng)豬工人,管理人員進(jìn)出豬場,是否帶毒?豬場想要復(fù)養(yǎng),但豬欄內(nèi)非洲豬瘟病毒情況如何?因此豬場環(huán)境、人員采樣檢測顯得尤為重要。
1、采樣工具準(zhǔn)備:在采樣管內(nèi)添加1ml無菌生理鹽水,準(zhǔn)備無菌棉簽;
2、豬場環(huán)境采樣:將無菌棉簽在豬場環(huán)境表面進(jìn)行擦拭,放入生理鹽水中洗脫待檢;
3、人員采樣:將無菌棉簽潤濕生理鹽水后在身體表面耳朵、頭發(fā)、鼻孔、手指等進(jìn)行擦拭;
環(huán)境樣本推薦使用商品化的核酸提取試劑盒提取樣本DNA進(jìn)行PCR檢測。按照提取試劑盒說明書操作步驟提取。
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